Novel Coronavirus (SARS-CoV-2) Multiplex Twous PCR an tan reyèl
Sa a trè sansib, pare-a-itilize PCR twous ki disponib nan fòma lyofilize (friz-siye pwosesis) pou alontèm depo. Twous la ka transpòte ak ki estoke nan tanperati chanm ak se ki estab pou yon ane. Chak tib nan premix gen tout nan reyaktif ki nesesè pou anplifikasyon an PCR, ki gen ladan ranvèse-transcriptase, Taq polymerase, prime, sond, ak substrats DNTPS. Li sèlman bezwen ajoute 13ul dlo distile ak 5UL extrait RNA modèl, Lè sa a, li ka kouri ak anplifye sou enstriman yo PCR.
Machin nan qPCR ta dwe satisfè kondisyon sa yo:
1. Fit 8 Strip PCR tib volim 0.2 ml
2. gen plis pase kat chanèl deteksyon:
| Kanal | Eksitasyon (NM) | Emisyon (NM) | Pre-kalibre koloran |
| 1. | 470 | 525 | Fam, sybr vèt mwen |
| 2 | 523 | 564 | Vic, Egzagòn, Tet, Joe |
| 3. | 571 | 621 | Rox, Texas-wouj |
| 4 | 630 | 670 | Cy5 |
PCR-Platforms:
7500REAL-TIME PCR SISTÈM, BIORAD CF96, ICYCLER IQ ™ an tan reyèl sistèm deteksyon PCR, STRATAGENE MX3000P, MX3005P
Difikilte a nan transpò chèn frèt nan roman coronavirus asid nikleyik deteksyon reyaktif
Lè konvansyonèl reyaktif asid nikleyik yo transpòte nan long distans, (-20 ± 5) ℃ depo chèn frèt ak transpò oblije asire byoaktif nan anzim nan reyaktif yo rete aktif. Pou asire w ke tanperati a rive nan estanda a, plizyè kilogram nan glas sèk yo bezwen pou chak bwat nan reyaktif tès asid nikleyik menm mwens pase 50g, men li ka sèlman dire pou de oswa twa jou. Sou pèspektiv nan pratik endistri a, pwa aktyèl la nan reyaktif ki soti nan manifaktirè se mwens pase 10% (oswa byen lwen mwens pase sa a valè) nan veso a. Pifò nan pwa a soti nan glas sèk, pake glas ak bwat kim, se konsa pri a transpò se ekstrèmman wo.
Nan mwa Mas 2020, COVID-19 yo te kòmanse kraze soti nan yon gwo echèl aletranje, ak demann lan pou roman coronavirus nikleyik asid deteksyon reyaktif ogmante dramatikman. Malgre gwo pwi de ekspòte reyaktif yo nan chèn frèt la, pifò manifaktirè yo ka toujou aksepte li akòz gwo kantite ak gwo pwofi.
Sepandan, ak amelyorasyon nan politik ekspòtasyon nasyonal pou pwodwi anti-pandemik, osi byen ke amelyore nan kontwòl nasyonal sou koule nan moun ak lojistik, gen ekstansyon ak ensèten nan tan an transpò nan reyaktif, ki a nan pwoblèm pwodwi enpòtan ki te koze pa transpò a. Tan transpò pwolonje (tan transpò nan apeprè mwatye yon mwa se trè komen) mennen nan echèk pwodwi souvan lè pwodwi a rive nan kliyan an. Sa a te boulvèse pi reyaktif asid nikleyik ekspòtasyon antrepriz.
Lyofilize teknoloji pou PCR reyaktif te ede transpò nan roman coronavirus asid nikleyè deteksyon reyaktif atravè lemond
Reyaktif yo PCR lyofilize ka transpòte ak ki estoke nan tanperati chanm, ki pa ka sèlman diminye pri a transpò, men tou, evite pwoblèm yo bon jan kalite ki te koze pa pwosesis transpò. Se poutèt sa, liofilizasyon reyaktif a se pi bon fason pou rezoud pwoblèm transpò ekspòtasyon an.
Lyofilizasyon enplike nan konjelasyon yon solisyon nan yon eta solid, ak Lè sa a, sublime ak separe vapè dlo a anba kondisyon vakyòm. Solit la seche rete nan veso a ak menm konpozisyon an ak aktivite. Konpare ak reyaktif likid konvansyonèl, plen-eleman lyofilize roman coronavirus asid asid deteksyon reyaktif ki te pwodwi pa cholaj bio gen karakteristik sa yo:
Estabilite chalè trè fò:Li ka ak tretman kanpe nan 56 ℃ pou 60 jou, ak mòfolojik la ak pèfòmans nan reyaktif a rete chanje.
Depo tanperati nòmal ak transpò:Pa gen bezwen pou chèn frèt, pa gen okenn bezwen nan magazen nan tanperati ki ba anvan unsealing, konplètman lage espas ki la depo frèt.
Pare-a-itilize:Lyophilizing nan tout eleman, pa gen okenn bezwen pou konfigirasyon sistèm, evite pèt la nan eleman ki gen viskozite segondè tankou anzim.
Objektif multiplex nan yon sèl tib:Sib la deteksyon kouvri roman coronavirus orf1ab jèn, N jèn, s jèn pou fè pou evite viris la genovariation. Yo nan lòd yo diminye fo negatif, imen RNase P jèn yo itilize kòm kontwòl entèn yo, konsa tankou satisfè bezwen nan klinik pou echantiyon kontwòl kalite.
